凝膠過濾層析(Gel filtration chromatography)法又稱為分子篩方法或分子排阻層析(Molecular-exclusion chromatography),主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的大小和形狀,即蛋白質(zhì)的質(zhì)量進(jìn)行分離和純化。
凝膠過濾層析是利用具有多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的顆粒的分子篩作用,根據(jù)被分離樣品中各組分相對分子質(zhì)量大小的差異進(jìn)行洗脫分離的一項(xiàng)技術(shù)。一般是大分子先流出來,小分子后流出來。
凝膠過濾層析原理
凝膠過濾層析的優(yōu)勢:
· 條件溫和,對蛋白活性保持率高;
· 可使用任何緩沖液,也可以把蛋白置換到任何緩沖液中;
· 既可以對標(biāo)簽蛋白進(jìn)行純化,也可以對非標(biāo)簽蛋白進(jìn)行純化。
凝膠過濾層析的用途:
· 粗分離——脫鹽/交換緩沖液;
· 精細(xì)分離——聚集體去除,分離不同大小分子量的蛋白質(zhì)
· 檢測用途——計(jì)算分子量等
常見的凝膠基質(zhì)有:瓊脂糖凝膠(sepharose)、架橋瓊脂糖凝膠(sepharose CL)、葡聚糖凝膠(sephadex)、聚丙烯酰胺凝膠、聚乙烯醇(TOSHO的Toyopearl)。BioToolomics凝膠過濾層析填料采用的是瓊脂糖凝膠來作為凝膠基質(zhì),分為4個(gè)系列:
· SepFast系列(未交聯(lián)的瓊脂糖)
· SepFast CL系列(交聯(lián)瓊脂糖)
· SepFast High Flow系列(高度交聯(lián)瓊脂糖)
· SepFast SEC系列(高度交聯(lián)的瓊脂糖或多糖復(fù)合物)
BioToolomics凝膠過濾層析填料的主要優(yōu)勢如下:
· 高分辨率
· 高選擇性
· 高回收率
· 高擴(kuò)展性
· 優(yōu)異的物理和機(jī)械穩(wěn)定性
· 經(jīng)濟(jì)高效
BioToolomics凝膠過濾層析填料部分產(chǎn)品參數(shù)信息:
BioToolomics凝膠過濾層析填料部分產(chǎn)品選擇指南:
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