熒光素是一種常見的生物發(fā)光報(bào)告子，用于體外成螢光素酶。這種螢火蟲螢光素酶的水溶性底物（通常來自Photinuspyralis）

利用ATP和Mg2+作為共因子在氧氣的存在。通過ATP的利用，反應(yīng)可以進(jìn)一步用于指示能量或生命的存在是為了起到生死攸關(guān)

的污點(diǎn)的作用。

螢火蟲螢光素酶是研究基因最chang用的報(bào)告基因之一表達(dá)由于其ji端的敏感性，以及快速，易于使用的系統(tǒng)。螢光素酶用于監(jiān)測(cè)

細(xì)菌、培養(yǎng)細(xì)胞以及轉(zhuǎn)基因植物或動(dòng)物。它是一種約61kDa的蛋白質(zhì)，作為單體具有活性，不需要加工其活動(dòng)。螢火蟲螢光素

酶通過催化熒光素的氧化羧化作用產(chǎn)生具有任何已知生物發(fā)光中最gao效率之一的反應(yīng)。螢光素活性可以通過與啟動(dòng)子/增強(qiáng)子的

相關(guān)性來表征基因調(diào)控元素。優(yōu)化后化學(xué)發(fā)光反應(yīng)和調(diào)節(jié)元件的轉(zhuǎn)錄活性。

本手冊(cè)旨在介紹一種簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、可靠的方法，用于在體外報(bào)告系統(tǒng)中檢測(cè)熒光素酶活性。

生物發(fā)光反應(yīng)：

幾個(gè)因素可能會(huì)影響反應(yīng)的靈敏度，包括溫度、pH或底物濃度我們建議使用pH為7.8的緩沖液，并在使用前將所有試劑預(yù)熱至

室溫，以獲得最佳結(jié)果。GoldBio還建議添加在測(cè)定緩沖液中過量的ATP和Mg2+用于更好的反應(yīng)。

當(dāng)熒光素被添加到螢光素酶樣品中時(shí)，會(huì)立即產(chǎn)生閃光在0.3-0.5秒內(nèi)達(dá)到峰值強(qiáng)度。然后，光線開始迅速衰減一半壽命約為0.5

-1.0分鐘。但當(dāng)輔酶A最初加入測(cè)定緩沖液時(shí)能夠防止快速反應(yīng)衰變延長(zhǎng)了反應(yīng)2-5分鐘。如果稍后添加到反應(yīng)中混合物，輔酶A也促進(jìn)額外的二次閃光。

Gold Bio推薦基于Yuichi Oba等人（2003）：

-100mM Tris-HCl（pH 7.8）

-5mM MgCl2

-250μM CoA

-150μM ATP（Fraga，2008）

-150μg/mL d-熒光素（GoldBio）

一些研究人員還添加了二硫蘇糖醇（DTT）或EDTA等成分（Steghans，1998）。您可以調(diào)整您的特定分析緩沖液以達(dá)到最佳

效果滿足您的需求。我們建議對(duì)您的特定細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)力學(xué)曲線的初步測(cè)試以獲得最佳效果。

GoldBio  D-熒光素鉀鹽體內(nèi)使用手冊(cè)提供者——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司：

一、輻射五大服務(wù)方向：

1.國(guó)內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理；

2.國(guó)外試劑訂購(gòu)（直訂，或境外代理）；

3.基因組測(cè)序（二代，二代+三代）；

4.基因分型（SNP檢測(cè)）：低/中/中 高通量項(xiàng)目；

5.生物樣本運(yùn)輸（國(guó)內(nèi)、）；

二、多家代理品牌，涉及30多種較有名品牌，經(jīng)營(yíng)代理500多個(gè)品牌：

Qiagen、Sigma、R&D、Epigentek、ThermoFisher、DNA Genotek、USA Scientific、Matreya、Sage Science、List Labs、Macrocyclics、Steraloids、NIBSC、mobio、immunodx、cellsystems、medicago、abcam、CST、Roche、Bethyl、sino Biological、clodrosome、adi BIO-WORLD、TOKU-E、HYPHEN BioMed、moltox、ZeptoMetrix、International Humic、biocytex、Toxin Technology  、Streck、Elastin、biomax、Orflo Technologies、Accegen、Advbiomart、genlantis、R&D、Cygnus Technologies LLC、Enzyme Research、Bio/Data Corporation、Greer Lab 、Solarbio、bangslabs、bioline、musechem、Novocastra stemrd、hyphen-biomed、polyplus、moltox 、exiqon、pentapharm、verichemlabs、GenStar、ALZET、lucernatechnologies 、meridian、origene、zimmerpeacocktech、horizondiscovery、Reagents、megazyme、elisasystems………

所有生物試劑耗材都可以進(jìn)口，特別是冷門品牌，均能給客戶購(gòu)買到。價(jià)格優(yōu)，貨期短，可加急，快10天到貨；保證服務(wù)質(zhì)量，所有產(chǎn)品均提供售后服務(wù)。大部分客戶我們提供貨到付款服務(wù)，

公司自成立依靠過硬的服務(wù)和良好的信譽(yù)與各大企事業(yè)單位、科研單位建立長(zhǎng)期合作。客戶包括北大，清華，地大，中科院各所，各大藥企等等。

專業(yè)訂購(gòu)國(guó)內(nèi)外試劑耗材，常備現(xiàn)貨，一手貨源，歡迎合作。